GIBCO胎牛血清的使用注意事項(xiàng)和作用
更新時(shí)間:2020-12-21 點(diǎn)擊次數(shù):912次
GIBCO胎牛血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動(dòng)物細(xì)胞本身不能合成(稱(chēng)為必需氨基酸)。血清含有的激素有胰島素、生長(zhǎng)激素等及多種生長(zhǎng)因子(如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子等)。血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促粘附因子及其他活性物質(zhì),能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和貼附。
GIBCO胎牛血清注意事項(xiàng):
1. 血清解凍與存放:-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,每隔一段時(shí)間輕輕搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處解凍,避免因溫度改變太大,造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,血清的質(zhì)量下降。若短期無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝,再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。4℃長(zhǎng)時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,形成絮狀物質(zhì)變差。
2. 血清是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞時(shí))建議滅活,在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅活血清。血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請(qǐng)按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
3.無(wú)血清培養(yǎng)基:無(wú)血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì),但是,血清仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成無(wú)血清培養(yǎng)液。
GIBCO胎牛血清所擁有的作用:
1、GIBCO胎牛血清起酸堿度緩沖液作用。
2、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4、提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
5、提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
6、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
7、GIBCO胎牛血清含有的內(nèi)毒素和血紅素,與Gibco南美和澳洲血清相比是低的,對(duì)于一些要求內(nèi)毒素和血紅素水平比較低的實(shí)驗(yàn)或診斷,非常適用。
8、用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清產(chǎn)自于無(wú)瘋牛病區(qū)域,具有低的病毒風(fēng)險(xiǎn)。 對(duì)牛病毒性腹瀉病毒含量要求非常低的學(xué)校、工業(yè)與前臨床研究來(lái)說(shuō)是重點(diǎn)選擇對(duì)象。