NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)在EDTA抗凝血中應(yīng)用第2篇
血常規(guī)檢測中最經(jīng)常使用的就是EDTA抗凝血,它能夠用于血細胞形態(tài)、生化檢測、血型鑒定、標(biāo)志物檢測、基因篩查等。常見的基因篩查都涉及到核酸提取和擴增。檢驗科或者實驗室最常使用的方法就是離心柱或者磁珠提取法進行DNA或者RNA提取。但是以上方法有以下盲點:
1、離心柱提取無法自動化,一次提取量受限于離心機規(guī)模,而且無法高通量操作;
2、磁珠提取法雖然能夠高通量,但是設(shè)備昂貴;
3、離心柱或者磁珠提取血量一般不低于200-300µL;
4、離心柱提取的核酸含量比較高,而磁珠依據(jù)廠家不同得率不穩(wěn)定;
5、前處理時間比較長;
6、離心柱的批間差異相對于磁珠更好控制;
綜上所述,兩種方法各有優(yōu)缺點,在通量、效率、自動化上很難兩全。鑒于此情況,我司開發(fā)的NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)和EDTA血檢測相結(jié)合,僅需要10-20抗凝血,同時可以處理百份甚至千份血液。所含試劑中不包含有生物酶制劑,例如蛋白酶K,所以批間差異很小??偨Y(jié)如下:
— EDTA血量少
— 5分鐘處理
— 高通量樣本量
— 無腦操作
— 無需大型設(shè)備
操作流程
案例A 不同體積人EDTA抗凝血處理后擴增4對引物
1、0.1μL 2、1μL 3、10μL 4、20μL 5、50μL 6、100μL 7、200μL
使用NuSmart®血液 PCR 試劑盒Plus(貨號Nu-B02)處理不同體積人EDTA抗凝血,使用2×Master TaqMix(With Dye)分別擴增4對引物。
案例B 人EDTA抗凝血處理后在50μL體系下擴增
1、1μL 2、2μL 3、5μL 4、10μL 5、15μL 6、20μL 7、23μL
使用NuSmart®血液 PCR 試劑盒Plus(貨號Nu-B02)處理10μL人EDTA抗凝血。在50μL擴增體系中,使用1μL到23μL模版體積擴增4對引物。
15021202164
上海市楊浦區(qū)國康路100號2層
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