櫻花OCT包埋劑在速凍中的應(yīng)用
更新時(shí)間：2023-02-27 點(diǎn)擊次數(shù)：3004次
櫻花OCT包埋劑在速凍中的應(yīng)用
櫻花OCT包埋劑是對(duì)冷凍切片質(zhì)量一重要影響因素，包埋劑用量要適宜，過(guò)多或過(guò)少都會(huì)影響標(biāo)本冷凍質(zhì)量。常用的有三種包埋劑OCT劑、B超藕合劑以及普通膠水。B超藕合劑適用于細(xì)胞豐富質(zhì)地較嫩的組織，普通膠水或OCT劑適用于纖維豐富質(zhì)地偏硬組織。（OCT包埋劑驟冷時(shí)固化，其冷凍速度和軟硬韌度與組織相近，其還具有水溶性，不影響染色等優(yōu)點(diǎn)。）
當(dāng)切片時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)冰凍過(guò)度時(shí)，可將冰凍的組織連同支承器取出來(lái)，在室溫停留片刻，再行切片，或者用口中哈氣，或者用大拇指按壓組織塊，以此來(lái)軟化組織，再行切片。另者，調(diào)高冰凍點(diǎn)。
解剖之后迅速取出所需的新鮮組織，用干紗布或?yàn)V紙擦干后不需固定直接取材（24×24×2mm＊），以防形成冰晶造成切片中形成形狀不一的空泡，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)移位。
取材中目的標(biāo)本既要明確也要確保其結(jié)構(gòu)的完整性，應(yīng)避免不必要的脂肪及壞死組織附著；要盡量剔除毛發(fā)、硬骨或鈣化物；保乳手術(shù)切緣由于脂肪組織較多，取材厚度不要超過(guò)3mm，厚者冰凍費(fèi)時(shí)，大者難以切完整。甲狀腺及淋巴結(jié)組織要帶全組織被膜并除去多余的脂肪組織。
速凍：
1、將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)（直徑約2cm）。
2、如組織塊小可適量加櫻花OCT包埋劑浸沒(méi)組織，然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。
3、當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開(kāi)始?xì)饣序v，此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中，大約10－20s組織即迅速冰結(jié)成塊。
4、在制成凍塊后，即可置入恒冷箱切片機(jī)冰凍切片。
5、若需要保存，應(yīng)快速以鋁箔或塑料薄膜封包，立即置入－80℃冰箱貯存?zhèn)溆谩?/div>
